自1964年美國學(xué)者Levin和Bang發(fā)現(xiàn)革蘭氏陰性菌內(nèi)毒素可能迅速引起鱟血細(xì)胞裂解液發(fā)生凝固、從而開發(fā)出了靈敏度和特異性都非常高的用于檢查藥品及醫(yī)療用具中的污染內(nèi)毒素的方法,即鱟試驗(yàn)法。在此方法建立以來的30多年間,各國學(xué)者對此方法及內(nèi)毒素本質(zhì)的深入研究可謂方興未艾。加之近年來,高靈敏度、高特異性鱟試劑的開發(fā)以及各種試驗(yàn)技術(shù)、試驗(yàn)方法等的不斷進(jìn)步,鱟試驗(yàn)法不僅在藥學(xué),而且在醫(yī)學(xué)、微生物學(xué)等各個領(lǐng)域的應(yīng)用也得到了突飛猛進(jìn)的發(fā)展,尤其是血中、體液中微量內(nèi)毒素的含量測定。革蘭氏陰性菌感染癥的診斷以及利用(1,3)-β-D-glucan葡聚糖與試劑的旁路反應(yīng)用于真菌感染癥的診斷在醫(yī)學(xué)方面應(yīng)用更是極為盛行的。
然而任何事物都是一分為二的,隨著科學(xué)技術(shù)的不斷進(jìn)步,以及人們認(rèn)識的深入和提高,一些新的,更加靈敏的試驗(yàn)方法不斷被人們開發(fā)出來。鱟試驗(yàn)法方法的發(fā)展也是一樣,從最初的凝膠半定量方法,逐漸向定量、微量試驗(yàn)方法轉(zhuǎn)變,而且應(yīng)用范圍也是越來越廣。
不可否認(rèn),鱟試驗(yàn)方法同最初的熱原檢查法一樣,也存在著很大的缺陷,其主要表現(xiàn)在以下幾個方面:
(1)由于是根據(jù)鱟的血細(xì)胞裂解物的凝固原理,因此,與哺乳動物的機(jī)體反應(yīng)系統(tǒng)是兩個不同的概念,即動物種類差異性;
(2)不能檢測出細(xì)菌內(nèi)的毒素;
(3)內(nèi)毒素以外的熱原性物質(zhì)(如外毒素肽聚糖、化學(xué)發(fā)熱物質(zhì)等)不能檢出;
(4)由于樣品的復(fù)雜性,存在假陽性物質(zhì)及干擾物質(zhì)。
因此我們在采用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法時一定要注意以下幾點(diǎn):
(1)與發(fā)熱試驗(yàn)的關(guān)性及關(guān)系;
(2)是否對細(xì)菌內(nèi)毒素的鱟試劑活性有影響的阻礙作用和促進(jìn)作用;
(3)是否用其他發(fā)熱性物質(zhì);
(4)制劑的多樣性;
(5)標(biāo)準(zhǔn)值的設(shè)定及依據(jù)與發(fā)熱試驗(yàn)的關(guān)系;
(6)測定方法的選擇;
(7)針對各種制劑確定其測定方法;
(8)確保安全性;
(9)國際間的協(xié)調(diào)性。