國內(nèi)外內(nèi)毒素檢測歷史闡述

在美國、日本、英國、意大利等國，用鱟試驗方法檢測內(nèi)毒素首先在藥品管理上逐漸取代了熱原檢測，美國是發(fā)明鱟試劑和最先建立鱟試驗方法的國家。

1956年，美國動物學(xué)家Bang發(fā)表了論文——“鱟的一種細(xì)菌性疾病"，闡述了細(xì)菌內(nèi)毒素使鱟血凝固的現(xiàn)象；1964年，Bang和Levin提出了鱟血凝集的初步機制；1968年，Bang和Levin又建立了鱟試驗檢測內(nèi)毒素的凝膠法，從而在藥物的檢測及臨床醫(yī)學(xué)上進行了研究和應(yīng)用；在臨床上，20世紀(jì)70年代初期即已開始在內(nèi)科領(lǐng)域中對內(nèi)毒素進行研究。實驗研究認(rèn)為，肝臟對內(nèi)毒素的處理起著重要作用，由于肝臟受損，腸內(nèi)內(nèi)毒素進入體循環(huán)。內(nèi)毒素與腸的關(guān)系密切，尤其是在肝硬化伴有腹水所致的內(nèi)毒素血癥。

1973年，美國食品與藥物管理局（FDA）認(rèn)可鱟試劑為一種生物制品；1978年，日本Harada首先創(chuàng)用基質(zhì)顯色法對內(nèi)毒素進行定量測定成功。基質(zhì)顯色法與凝膠法一樣，均利用鱟血變形細(xì)胞裂解物中含有被微量內(nèi)毒素激活的凝固系統(tǒng)設(shè)計而成。1980年，FDA發(fā)布用鱟試劑來檢測人用和獸用注射藥成品的內(nèi)毒素；同年，《美國藥典》收載細(xì)菌內(nèi)毒素檢測法，但在藥典各品種正文中未涉及；1983年，《美國藥典》第Ⅰ版第四增補本規(guī)定了用細(xì)菌內(nèi)毒素檢測取代5種水和40種放射性藥品的熱原檢查。1987年，美國FDA在《鱟試劑檢查人用和獸用注射藥成品內(nèi)毒素的準(zhǔn)則》中制訂了細(xì)菌內(nèi)毒素定量測定法的指導(dǎo)原則，并在1991年對動態(tài)法進行了相應(yīng)的補充規(guī)定；1991年《美國藥典》第Ⅱ版第五增補本規(guī)定了185種藥品以細(xì)菌內(nèi)毒素檢查取代熱原檢查；1995年，《美國藥典》第Ⅲ版規(guī)定了471種藥品用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法檢查，保留熱原檢查的藥品不足40種。目前，《英國藥典》1999年版及《日本藥典》2000年版均制訂了細(xì)菌內(nèi)毒素定量測定法的指導(dǎo)原則。

中國是目前世界上鱟試劑產(chǎn)量最大的國家之一。

1975~1982年是我國鱟試劑的試制階段，當(dāng)時由于缺乏標(biāo)準(zhǔn)研究基礎(chǔ)，沒有較為統(tǒng)一的實驗方法準(zhǔn)則，因此在內(nèi)毒素檢測應(yīng)用上比國外稍晚了一步。1983年，衛(wèi)生部授權(quán)國家藥品生物制品檢定所組織全國范圍的大輸液及放射性藥品用鱟試劑檢測的協(xié)作研究；1988年，衛(wèi)生部頒布了細(xì)菌內(nèi)毒素檢測法（凝膠法），允許4種藥品使用細(xì)菌內(nèi)毒素檢測法初檢；1993年，《中國藥典》第五版第二增補本收載了細(xì)菌內(nèi)毒素檢測法，但未涉及任何品種正文；1995年，《中國藥典》第六版二部附錄收載了經(jīng)修訂的細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法，正文規(guī)定對注射用水等5種常用藥品和9種放射性藥品用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查取代了熱原檢查（其中濃度為5%及10%的葡萄糖注射液是后來發(fā)通知補充的）；1995年，《中國藥典細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法實施會議紀(jì)要》提出，爭取在3~5年內(nèi)將我國上百種藥品由熱原檢查改為細(xì)菌內(nèi)毒素檢查（凝膠法）。

2000年版的《中國藥典》收載的藥品品種較1995年版有了明顯增加，已由原來局限的5種大輸液和9種放射藥品共14個品種擴大到67個品種，其中抗生素29種、化學(xué)藥品10種、生化藥品9種、放射藥品19種，并制訂了細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原則，其中規(guī)定應(yīng)用凝膠法的同時可做定量法（終點濁度法、終止顯色基質(zhì)法及動態(tài)顯色基質(zhì)法）予以參比。

國內(nèi)在1980年開始應(yīng)用鱟試劑做臨床有關(guān)疾病的檢測；于1985年開始應(yīng)用定量法（基質(zhì)顯色法）檢查血液、尿液、腦脊液、腹水及生物制品中的微量內(nèi)毒素。

如今，《中國藥典》中的細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法不斷完善，《中國藥典》2025年版將在2023年11月7-9號對編制進展和擬增修訂共性標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容進行介紹和解讀，讓我們拭目以待。