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凋亡的形態(tài)學(xué)特征

發(fā)布時(shí)間: 2023-07-25  點(diǎn)擊次數(shù): 509次

發(fā)生凋亡的細(xì)胞,其表面的微絨毛消失,并逐步脫離與周圍細(xì)胞的接觸。形態(tài)上,凋亡細(xì)胞首先變圓,與鄰近細(xì)胞脫離,失去微絨毛,胞質(zhì)脫水濃縮,胞膜迅速發(fā)生空泡化(bleb-bing),細(xì)胞體積逐漸縮小,出現(xiàn)固縮(condensation),內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張呈泡狀并與細(xì)胞膜融合,形成膜表面的芽狀突起,稱為出芽(buding)。晚期,核染色質(zhì)高度濃縮融合成團(tuán)狀,核染色質(zhì)密度增高呈半月形或馬蹄形分布,并凝集在核膜周邊,稱為染色質(zhì)邊集(margination)。核仁裂解,進(jìn)而胞膜皺縮內(nèi)陷,自行分割為多個(gè)外部有膜包裹的、內(nèi)含物不外泄的泡狀小體,稱為凋亡小體(apoptosis body),最終被鄰近細(xì)胞所識(shí)別、吞噬消化,或自然脫落而離開(kāi)生物體。

7.12凋亡的形態(tài)學(xué)特征.png

DNA迅速被核酶所降解,產(chǎn)生若干個(gè)大小不同的寡核苷酸碎片,在瓊脂糖凝膠電泳上呈現(xiàn)階梯狀核蛋白區(qū)帶圖譜。由于酶切的位點(diǎn)在核小體處,而核小體的核苷酸為180bp,所以產(chǎn)生不同倍數(shù)的180~200個(gè)堿基對(duì)的核酸片段電泳區(qū)帶。但在整個(gè)過(guò)程中,線粒體內(nèi)的 DNA并不發(fā)生斷裂。

由于這種死亡過(guò)程沒(méi)有溶酶體酶及胞膜破裂,所以,細(xì)胞內(nèi)涵物不外泄。近年來(lái)的研究發(fā)現(xiàn),凋亡細(xì)胞表面有糖蛋白的末端唾液酸殘基發(fā)生丟失,膜磷脂層不對(duì)稱性被破壞﹑磷脂酰絲氨酸暴露等改變,均可以促使吞噬細(xì)胞對(duì)凋亡細(xì)胞的識(shí)別,凋亡時(shí)常常無(wú)炎癥反應(yīng)也正是因?yàn)檫@個(gè)緣故,因此長(zhǎng)期以來(lái)凋亡一直未引起人們的重視。

通過(guò)流式細(xì)胞儀等方法觀察發(fā)現(xiàn),凋亡與死亡有明顯的差異(表21-1),凋亡細(xì)胞具有以下特征:①由于細(xì)胞核酸內(nèi)切酶激活,使DNA特征性熒光染色減少。②細(xì)胞質(zhì)膜保持一定的完整性。③線粒體跨膜電位下降。④保留ATP依賴的溶酶體質(zhì)子泵。⑤細(xì)胞蛋白含量明顯減少,系由內(nèi)源性蛋白酶被激活,蛋白質(zhì)酶解增加所致.⑥在胸腺細(xì)胞,凋亡發(fā)生在G。期。⑦光吸收減少,直角散射不變(HL-60細(xì)胞)或增加(胸腺細(xì)胞)。

7.12圖片1.png

細(xì)胞凋亡的發(fā)展包括兩個(gè)不同時(shí)期:

1)致死前期(prelethal stage):是凋亡時(shí)細(xì)胞損傷的早期,具有可逆性,此時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞皺縮、核染色質(zhì)固縮、胞質(zhì)中含空泡等變化,最后出現(xiàn)線粒體腫脹。

2)致死期(lethal stage):凋亡細(xì)胞進(jìn)入死亡階段,此時(shí)變化不可逆,出現(xiàn)質(zhì)膜連續(xù)性破壞和染色質(zhì)嚴(yán)重固縮、融化及腫脹的線粒體中絮狀集結(jié)和(或)鈣化。這常常見(jiàn)于脫落的凋亡細(xì)胞中,或吞噬了致死前期空泡片段的鄰近細(xì)胞的溶酶體中。



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