內(nèi)毒素檢測(cè)時(shí)，血液前處理方法的注意點(diǎn)有哪些？

1、在進(jìn)行血中內(nèi)毒素測(cè)定時(shí)，要注意選擇方法和試劑。

2、血漿或血清制備

作為臨床上常用樣本主要為血漿，其使用率占95%以上，因此作為體液主要部分血漿的制備就顯得十分重要。據(jù)Das報(bào)道：內(nèi)毒素一般除了游離狀態(tài)外，還大量附著在血小板上，因此用含有大量血小板的血漿作為樣品更為合適。在制備人血漿或動(dòng)物血漿時(shí)，目前國(guó)外為了防止細(xì)胞的破壞多采用低溫分離，使用含有大量血小板的血漿樣品，即在4℃1000gx10分鐘分離條件，或在無(wú)低溫離心機(jī)時(shí)用3000gx40秒分離條件。切不可在常溫下進(jìn)行高速、長(zhǎng)時(shí)間分離，另外，在分離血漿或血清時(shí)，要避免細(xì)菌的污染。

血清的制備：用不加抗凝劑的注射器采血轉(zhuǎn)入離心管中，在冰水浴中放置30分鐘，4℃條件下、1000xg、10分鐘進(jìn)行離心分離血清。

血漿或血清分離后，若暫時(shí)不用，可在-80℃冰凍保存，并在1個(gè)月以內(nèi)使用。注意為了避免吸附內(nèi)毒素，請(qǐng)使用玻璃制試管保存。

3、抗凝劑種類及影響

在制備血漿時(shí)由于加入一定的抗凝劑，因此抗凝劑的種類和加入量對(duì)于回收率都有很大的影響，一般常用抗凝劑主要有：肝素，枸櫞酸鈉及EDTA等，其中以肝素的使用最多。然而，我們知道大量的肝素會(huì)對(duì)內(nèi)毒素反應(yīng)有干擾作用，尤其對(duì)稀釋加熱法和氯仿提取法將使回收率下降，而對(duì)PCA法影響較少，因此在制備血漿時(shí)肝素的加放量只需2~5μl/ml即可。